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小鼠15脂加氧酶(15-LOLOX)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)說明書
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  小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)說明書

  BS-2378小鼠15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA試劑盒

  實(shí)驗(yàn)原理

  采用雙抗體夾心法,通過預(yù)包被抗15-LOX單抗捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白,再與生物素標(biāo)記的二抗結(jié)合形成復(fù)合物,經(jīng)TMB顯色后測定450nm吸光度,濃度與OD值呈正相關(guān)。

  試劑盒組成

  組分48T規(guī)格96T規(guī)格保存條件

  預(yù)包被酶標(biāo)板8×6條8×12條2-8℃

  標(biāo)準(zhǔn)品0.5mL(0-10ng/mL)0.5mL(0-10ng/mL)-20℃

  生物素化檢測抗體60μL(100×)120μL(100×)2-8℃

  TMB顯色液(A/B)各3mL各6mL避光2-8℃

  20×濃縮洗滌液30mL60mL室溫

  樣本處理要求

  血清/血漿:

  使用EDTA抗凝管采集,2000-3000rpm離心20分鐘,避免溶血。

  短期保存于2-8℃(≤48小時(shí)),長期需-20℃分裝,避免反復(fù)凍融。

  組織勻漿:

  按1:9比例加入PBS(pH7.4),機(jī)械勻漿后離心取上清。

  操作步驟

  標(biāo)準(zhǔn)品梯度稀釋:取7支EP管,按1:2比例稀釋至0.156-10ng/mL。

  加樣孵育:每孔加入100μL標(biāo)準(zhǔn)品/樣本,37℃孵育90分鐘。

  洗滌顯色:棄液后加入生物素化抗體,37℃孵育60分鐘,TMB避光顯色15分鐘。

  終止檢測:加入終止液后30分鐘內(nèi)讀取450nm吸光度。

  結(jié)果分析

  標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合:推薦四參數(shù)邏輯回歸(R2>0.99) 。

  靈敏度:0.156ng/mL,線性范圍0.156-10ng/mL。

  注意事項(xiàng)

  顯色液需避光保存,避免金屬離子污染。

  濃縮洗滌液需用蒸餾水1:20稀釋,現(xiàn)配現(xiàn)用。

  高脂樣本需離心去除懸浮物,避免假陽性。

  注意:以上僅供參考,不作為實(shí)際數(shù)據(jù),實(shí)驗(yàn)需嚴(yán)格遵循說明或咨詢技術(shù)老師。 Elisa試劑盒

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